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人参茎叶总皂苷

人参茎叶总皂苷/Renshen Jingye Zongzaogan/TOATAL GINSENOSIDE OF GINSENGSTEMS AND LEAVES

本品为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥茎叶经加工制成的总皂苷。

【制法】取人参茎叶,切成1~2cm段,加水煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时,煎液滤过,合并滤液,通过D101型大孔吸附树脂柱,水洗脱至无色,再用60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液,滤液浓缩至相对密度为1.06~1.08(80℃)的清膏,干燥,粉碎,即得。

【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末;微臭,味苦;具吸湿性。

本品在甲醇或乙醇中易溶,在水中溶解,在乙醚或石油醚中几乎不溶。

【鉴别】(1)取本品0.1g,置试管中,加水2ml,用力振摇,产生持久性泡沫。

(2)取本品0.1g,加甲醇10ml使溶解,作为供试品溶液;另取人参茎叶对照药材1g,加水100ml,煎煮2小时,滤过,滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm,柱高为15cm),用水洗至无色,弃去水液,再用60%乙醇20ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用甲醇10ml使溶解,作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rgl对照品与人参皂苷Re对照品,加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录0502)试验,吸取上述三种溶液各2μ1,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,日光下显相同颜色的斑点,紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

【检查】粒度 依法检查(附录0982第二法),能通过120目筛的粉末不少于95%。

干燥失重 取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过 5.0%(附录 0831)。

总灰分 不得过1.5% (附录2302)。

炽灼残渣 不得过1.5%(附录0841)。

重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录2321)测定,铅不得过2mg/kg;镉不得过0.2mg/kg;砷不得过2mg/kg;汞不得过0.2mg/kg;铜不得过20mg/kg。

有机氯农药残留量 照农药残留量测定法(附录2341有机氯类农药残留测定法——第一法)测定。六六六(总BHC)不得过0.1mg/kg;滴滴涕(总DDT)不得过1mg/kg;五氯硝基苯(PCNB)不得过0.1mg/kg。

【特征图谱】照高效液相色谱法(附录0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm,内径为4.6μm,粒径为5μm,载碳量11%);以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;柱温为30℃;流速为每分钟1.3ml,检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于6000,按人参皂苷Rd峰计算应不低于200 000。



参照物溶液的制备 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml各含人参皂苷Rg1 0.3mg、人参皂苷Re 0.5mg和人参皂苷Rd 0.2mg的溶液,即得。

供试品溶液的制备 取本品20mg,精密称定,置10ml量瓶中,加甲醇超声使溶解并稀释至刻度,滤过,取续滤液,即得。

测定法 分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录60分钟的色谱图,即得。

供试品特征图谱中应有6个特征峰,其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同,与人参皂苷Rd参照物峰相应的峰为S峰,计算特征峰3~6的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±5%之内。规定值为:0.93(峰3)、0. 95(峰 4)、0. 97(峰 5)、1. 00(峰 6)。



【含量测定】人参茎叶总皂苷 对照品溶液的制备 取人参皂苷Re对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,即得。

标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl,分别置于具塞试管中,低温挥去溶剂,加入1%香草醛高氯酸试液0.5ml,置60℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟,立即用冰水冷却2分钟,加入77%硫酸溶液5ml,摇匀;以相应试剂作空白,照紫外-可见分光光度法(附录0401),在540mn波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。

测定法 取本品约50mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取50μl,照标准曲线制备项下的方法,自“置于具塞试管中”起依法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量,计算结果乘以0.84,即得。

本品按干燥品计算,含人参总皂苷以人参皂苷Re(C48H82018)计,应为 75%~95%。

人参皂苷Rg1、Re、Rd照高效液相色谱法(附录0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1 %磷酸溶液为流动相B,按〔特征图谱〕项表中梯度进行洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量,精密称定,加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg1 0.30mg、人参皂苷Re 0.50mg和人参皂苷Rd 0.20mg的混合溶液。

供试品溶液的制备 取〔特征图谱〕项下的供试品溶液,即得。溶液5~20μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品按干燥品计算,含人参皂苷Rg1(C42H72014)、人参皂苷Re(C48H82018)和人参皂苷Rd(C48H82018)的总量应为30%~45%。

【贮藏】密闭,置干燥处。

【制剂】口服。

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